CM-DiI（改良探針）與DiI（傳統(tǒng)探針）在透化和非透化處理樣本的效果比較：【來(lái)自文獻(xiàn)Staffend NA, et al. DiOlistic labeling of neurons in tissue slices: a qualitative and quantitative analysis of methodological variations.Front Neuroanat. 2011 Mar 1;5:14.】
1、未透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較
結(jié)果顯示【見(jiàn)圖1&圖2】：兩種熒光探針（DiI和CM-DiI）標(biāo)記組織的全細(xì)胞檢測(cè)顯示，不管是即刻觀察，還是2周后觀察，染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對(duì)于樹(shù)突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外，通過(guò)分析樹(shù)突段的突棘密度來(lái)調(diào)查不同時(shí)間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對(duì)于DiI標(biāo)記的樹(shù)突段，不會(huì)時(shí)間段染色幾乎無(wú)差異。然而，CM-DiI標(biāo)記的樹(shù)突段，突棘密度封片2周后明顯增強(qiáng)。
圖1（左）. 非透化熒光染色組織的全細(xì)胞檢測(cè)。A）DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；B）DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；C）CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；D）CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；
圖2（右）. 非透化熒光染色組織的樹(shù)突片段檢測(cè)。A）DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；B）DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；C）CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；D）CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；
2、透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較
結(jié)果顯示【見(jiàn)圖3&圖4】：兩種熒光探針（DiI和CM-DiI）標(biāo)記組織封片后即刻檢測(cè)，不論是全細(xì)胞還是樹(shù)突段，結(jié)果都無(wú)明顯差異；兩種熒光探針（DiI和CM-DiI）標(biāo)記組織封片2周后檢測(cè)，不論是全細(xì)胞還是樹(shù)突段，CM-DiI標(biāo)記的穩(wěn)定性在熒光信號(hào)、光淬滅和zui終圖片質(zhì)量上都強(qiáng)于DiI。
不管是即刻觀察，還是2周后觀察，染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對(duì)于樹(shù)突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外，通過(guò)分析樹(shù)突段的突棘密度來(lái)調(diào)查不同時(shí)間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對(duì)于DiI標(biāo)記的樹(shù)突段，不會(huì)時(shí)間段染色幾乎無(wú)差異。然而，CM-DiI標(biāo)記的樹(shù)突段，突棘密度封片2周后明顯增強(qiáng)。
圖3（左）. 透化熒光染色組織的全細(xì)胞檢測(cè)。A）DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；B）DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；C）CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；D）CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；
圖4（右）. 透化熒光染色組織的樹(shù)突片段檢測(cè)。A）DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；B）DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；C）CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè)；D）CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè)；
溫馨提示：對(duì)于不經(jīng)透化處理的樣本，只需用傳統(tǒng)的細(xì)胞膜熒光探針如DiI染色即可。對(duì)于后續(xù)需透化處理的樣本，推薦用改良探針如CM-DiI（貨號(hào)：MX4007-50UG）進(jìn)行染色。
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貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | Ex/Em (nm) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
MX4007-50UG | Celltracker CM-DiI 活細(xì)胞示蹤劑CM-DiI（紅色） | 553/570 | 1×50μg | 340.00 |
MX4007-250UG | Celltracker CM-DiI 活細(xì)胞示蹤劑CM-DiI（紅色） | 553/570 | 5×50μg | 1360.00 |
MX4002-10MG | DiI （橙紅色熒光探針） | 549/565 | 10mg | 398 |
細(xì)胞膜探針光譜和檢測(cè)濾片：
熒光探針 | zui大激發(fā)/zui大發(fā)射波長(zhǎng) （Ex/Em） | 濾光片編號(hào) | |
Omeaga公司 | Chroma公司 | ||
DiI | 549/565nm | XF108, XF32 | 41002, 31002 |
CM-DiI | 553/570nm | XF32 | 31002 |